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凍存過(guò)的全血為什么不建議再拿來(lái)做ELISA實(shí)驗(yàn)?
很多ELISA實(shí)驗(yàn)新手客戶(hù)都會(huì)咨詢(xún)我司技術(shù)能否把全血提取出來(lái)放-70℃條件保存，等實(shí)驗(yàn)開(kāi)展了(比如一個(gè)月左右的時(shí)間)再離心全血取血清或者血漿做ELISA實(shí)驗(yàn)?這種做法我司技術(shù)都是持反對(duì)建議的。與此同時(shí)，也是明確要求我司銷(xiāo)售人員在與客戶(hù)售前溝通時(shí)建議老師全血樣本提取好了應(yīng)該及時(shí)離心出血清或者血漿。并要求-70℃條件下保存，如果一個(gè)月左右可以開(kāi)展實(shí)驗(yàn)可以-20℃保存，期間不能反復(fù)凍融。至于凍存后的全血不可以再提取血清、血漿樣本來(lái)做elisa的具體原因如下：
1.全血凍存后解凍，用常規(guī)離心方式提取血清仍然是可以的，不利的一點(diǎn)是，伴隨凍融的過(guò)程，會(huì)出現(xiàn)比較嚴(yán)重的溶血事件。而后提取出來(lái)的血清能否做elisa，主要取決于溶血程度、你所要檢測(cè)的目標(biāo)蛋白的性質(zhì)及你實(shí)驗(yàn)的目的。
2.溶血釋放的胞內(nèi)組分往往容易影響本底，甚至出現(xiàn)假陽(yáng)性;而蛋白酶的釋放可能導(dǎo)致目的蛋白的降解影響結(jié)果;目的蛋白的大小、穩(wěn)定性、特異性(相對(duì)抗體而言)又影響其自身與酶標(biāo)板的吸附、自身降解、自身與抗體的結(jié)合率等等。以上各種不確定性因素存在下，如果你只是對(duì)血清中某種血清蛋白做定性檢測(cè)的話，做elisa應(yīng)該問(wèn)題不大;若是定量分析的話，從可靠性的角度上看，不建議該做法。
elisa試劑盒需求多少血樣?
1.請(qǐng)問(wèn)每孔需求多少u(mài)l血清，其他，比如說(shuō)需求100ul血清，那么需求留取多少人抗凝血呢?一般常用的ELISA試劑盒有96孔，根據(jù)試驗(yàn)需求做復(fù)孔，陰性、陽(yáng)性對(duì)照組。復(fù)孔一般設(shè)3孔。
2.試驗(yàn)都是取5ML的抗凝血離心后取血清，能夠得到許多血清。然后分裝到EP管凍存，然后取一部分來(lái)做ELISA試劑盒，其他的做其他試驗(yàn)用。
3.需求的樣本量取決于你的檢查項(xiàng)目,有些檢查項(xiàng)目需求血清做1:100稀釋,乃至是更高的稀釋度,那么幾微升血樣就夠了,有些項(xiàng)目只能做較低的稀釋,乃至不稀釋,這么的話每孔會(huì)需求100ul分配.
關(guān)于抗凝血和得到的聯(lián)絡(luò),大致上份額是1毫升全血能夠得到500ul血清或血漿.我血樣是現(xiàn)已把細(xì)胞分離出來(lái)了的,現(xiàn)要提DNA,試劑盒上說(shuō)"取0.3-0.5ml全血到1ml純化樹(shù)脂中",應(yīng)取多少μl細(xì)胞?
elisa試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。
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