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小鼠抑絲蛋白2(PFN2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)
BS-9418小鼠抑絲蛋白2(PFN2)ELISA試劑盒
一、試劑盒基本信息
小鼠抑絲蛋白2(PFN2)ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法原理設(shè)計(jì)，用于定量檢測(cè)小鼠血清、血漿、組織勻漿等樣本中的PFN2蛋白濃度。本試劑盒具有高靈敏度(通常≤0.137ng/mL)和良好的特異性，與相似物質(zhì)無(wú)明顯交叉反應(yīng)?。檢測(cè)線性范圍一般為0.312-20ng/mL，精密度批內(nèi)差CV<10%，批間差CV<12%?。
二、試劑盒組成
試劑盒主要包含以下組分(以96T規(guī)格為例)：
預(yù)包被酶標(biāo)板：8×12條(包被PFN2捕獲抗體)
標(biāo)準(zhǔn)品：1支(需按說(shuō)明書(shū)稀釋)
標(biāo)準(zhǔn)品/樣品稀釋液：15ml
生物素化檢測(cè)抗體(100×)：1支
生物素化檢測(cè)抗體稀釋液：12ml
SABC復(fù)合物：12ml
TMB顯色液(A/B)：各6ml
終止液：12ml
20×濃縮洗滌液：60ml
封板膠紙：4張?
三、樣本收集與處理
1. 樣本類(lèi)型
適用于血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液及其他生物體液?。
2. 樣本采集
血清?：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管收集血液，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘分離血清
血漿?：使用EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清
組織勻漿?：加入適量生理鹽水搗碎后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清
細(xì)胞上清液?：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物?
3. 樣本保存
短期(48小時(shí)內(nèi))可保存于2-8℃;長(zhǎng)期保存需分裝后凍存于-20℃或-80℃，避免反復(fù)凍融?。
四、實(shí)驗(yàn)操作步驟
1. 試劑準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行梯度稀釋(通常為1:2系列稀釋)
洗滌液配制?：將20×濃縮洗滌液用蒸餾水按1:20稀釋?
2. 加樣
設(shè)空白孔(不加樣品及酶標(biāo)試劑)、標(biāo)準(zhǔn)孔和待測(cè)樣品孔
標(biāo)準(zhǔn)孔加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品
待測(cè)樣品孔先加40μl樣品稀釋液，再加10μl待測(cè)樣品(終稀釋度5倍)
加樣時(shí)避免觸及孔壁，輕輕混勻?
3. 孵育
封板后37℃溫育30分鐘?
溫育時(shí)建議將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，避免液體蒸發(fā)?
4. 洗滌
手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置1分鐘后甩盡，重復(fù)5次
最后一次洗滌后在吸水紙上拍干，避免殘留?
5. 加檢測(cè)抗體
每孔加入50μl生物素化檢測(cè)抗體工作液(空白孔除外)
37℃溫育30分鐘?
6. 加酶結(jié)合物
每孔加入50μl酶結(jié)合物工作液
37℃避光溫育30分鐘?
7. 顯色
每孔依次加入50μl顯色劑A和50μl顯色劑B
37℃避光顯色10分鐘(需定時(shí)觀察顏色變化)?
8. 終止反應(yīng)
每孔加入50μl終止液(顏色由藍(lán)變黃)
15分鐘內(nèi)完成OD值測(cè)定?
五、結(jié)果計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
根據(jù)樣品OD值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出相應(yīng)濃度
若樣品經(jīng)過(guò)稀釋?zhuān)璩艘韵♂尡稊?shù)得到實(shí)際濃度?
六、注意事項(xiàng)
試劑保存?：未開(kāi)封試劑盒2-8℃保存;使用前室溫平衡20分鐘;濃縮洗滌液結(jié)晶屬正?，F(xiàn)象，水浴加熱溶解后使用?
操作規(guī)范?：
使用一次性吸頭避免交叉污染
不同批次試劑勿混用
嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)控制溫育時(shí)間和溫度?
安全防護(hù)?：
操作時(shí)佩戴手套和口罩
避免直接接觸終止液和顯色液
勿用嘴吸取任何試劑?
質(zhì)量控制?：
每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)包含標(biāo)準(zhǔn)曲線和質(zhì)控樣本
回收率應(yīng)在80-120%之間(血清樣本回收率通常為87-94%)?
結(jié)果解釋?：
本試劑盒僅供科研使用，不用于臨床診斷
樣本值超出檢測(cè)范圍時(shí)需適當(dāng)稀釋后重測(cè)
注：以上資料僅供參考，具體產(chǎn)品請(qǐng)咨詢(xún)技術(shù)老師或是品牌供應(yīng)商。
天津本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。
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