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　　小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒實驗說明書

　　BS-2383 小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒

　　一、實驗原理

　　采用雙抗體夾心ELISA法，通過特異性抗體捕獲樣本中的α1-AGP，經(jīng)酶標(biāo)二抗顯色后，通過吸光度值定量檢測。

　　二、試劑盒組成

　　組分規(guī)格保存條件

　　預(yù)包被板條96T/48T2-8℃

　　標(biāo)準(zhǔn)品(凍干)2支-20℃

　　酶標(biāo)抗體1瓶2-8℃避光

　　顯色底物1瓶2-8℃避光

　　終止液1瓶室溫

　　三、操作步驟

　　樣本處理

　　血清/血漿：離心后取上清，避免溶血。

　　細(xì)胞上清：離心去除顆粒物，立即檢測或-80℃保存。

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

　　標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋(0-1000 ng/mL)，每個濃度設(shè)復(fù)孔。

　　加樣與孵育

　　每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本，37℃孵育90分鐘。

　　洗滌后加入酶標(biāo)抗體，37℃孵育60分鐘。

　　顯色與終止

　　加入顯色底物避光反應(yīng)15分鐘，終止液終止反應(yīng)。

　　檢測

　　450nm波長測定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算濃度。

　　四、注意事項

　　樣本要求：避免反復(fù)凍融，避免使用高脂或溶血樣本。

　　試劑平衡：使用前需恢復(fù)至室溫，避免冷凝水影響結(jié)果。

　　交叉污染：槍頭需更換，避免孔間污染。

　　五、性能參數(shù)

　　靈敏度：檢測限≤0.5 ng/mL。

　　回收率：85%-115%。

　　批間差：CV<10% 。

　　六、結(jié)果計算

　　采用四參數(shù)邏輯曲線擬合，樣本濃度=標(biāo)準(zhǔn)曲線對應(yīng)值×稀釋倍數(shù)。

　　七、常見問題

　　高背景值：可能因洗滌不充分或抗體濃度過高。

　　線性不佳：檢查標(biāo)準(zhǔn)品稀釋準(zhǔn)確性或孵育時間。

　　注意：以上僅供參考，不作為實際數(shù)據(jù)，實驗需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。

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